霉菌是一類絲狀真菌，廣泛存在于潮濕、溫暖環境，通過菌絲體形成絨毛狀或絮狀菌落，依靠孢子繁殖傳播。它既能分解有機物維持生態平衡，也可能引發霉變、腐敗甚至人體感染。

一、樣本采集與處理問題

1.采樣代表性不足

固態樣品（如谷物、堅果）因霉菌分布不均易漏檢，需采用五點采樣法并研磨至粒徑＜2mm以提高均質性。

關鍵措施：干燥樣品優先選用耐高滲培養基（如DG18）同步培養。

2.假陰性風險

樣本放置＞4小時可致孢子活性顯著下降；臨床樣本中雖有癥狀但檢出陰性，可能因早期感染菌量不足、采樣不當或檢測誤差。

改進方案：

建立"采樣-處理"時間軸（建議≤2小時）

無菌部位標本需結合組織病理學與培養結果綜合判斷

二、培養基與培養條件缺陷

培養基選擇誤區

特別建議：高滲食品（蜜餞、腌制品）需同步使用PDA+DG18雙培養基。

培養環境失控

溫濕度偏差：28±1℃/RH 65-80%為最佳條件，濕度波動可致檢出率偏差達42%

交叉污染：

培養箱內霉菌孢子通過平皿縫隙污染（玻璃平皿風險＞塑料平皿）

冷凝水滴落導致菌落蔓延

解決策略：

每周2次紫外線+消毒劑（75%酒精）擦拭培養箱

培養前37℃烘干平皿消除冷凝水

三、鑒定與結果判讀難點

1.污染菌誤判

血培養檢出曲霉菌屬多屬污染，而鐮刀菌屬可能為致病菌

判定標準：

非無菌標本需鏡檢與培養一致+連續陽性+37℃生長能力

陰道分泌物需區分酵母菌與霉菌，勿籠統報告"霉菌"

2.技術局限性

形態學鑒定需配合乳酸酚棉藍染色及ATCC標準菌株比對

PCR檢測中引物設計不當或交叉污染可致假陽性（推薦UV滅菌工作臺）

四、實驗室污染防控

1.培養箱污染驗證

空白平板置培養箱48h，出現菌落即確認污染

2.環境監控

沉降菌檢測每周3次，潔凈區需符合單方向工作流要求

3.操作規范

病原菌檢測需在二級生物安全實驗室進行